8-OHdG ELISA分析試劑盒

8-OHdG ELISA分析試劑盒僅供研究使用

靈敏度：0.59 ng / mL
動態(tài)范圍：0.94 – 60 ng / mL
孵育時間：1小時
樣品類型：細胞裂解液，血漿，樣品基質(zhì)，尿液
樣品量：50μL

StressMarq在加拿大制造的產(chǎn)品。

分析背景

8-羥基-2-脫氧鳥苷（8-OH-dG）是由活性氧和氮對DNA的氧化破壞而產(chǎn)生的，并作為氧化應激的既定標志物。鳥嘌呤的羥化反應是對正常代謝過程和多種環(huán)境因素（即增加活性氧和氮種類的任何物質(zhì)）的響應。8-OH-dG的水平升高與衰老過程以及許多病理狀況（包括癌癥，糖尿病和高血壓）有關(guān)。在復雜的樣品（例如血漿，細胞裂解物和組織）中，8-OH-dG可以以游離核苷的形式存在，也可以以摻入DNA的形式存在。血液進入腎臟后，游離的8-OH-dG會很容易地過濾到尿液中，而較大的DNA的片段則保留在血液中。由于血漿樣品的復雜性，尿比血漿更適合用于測量游離的8-OH-dG。尿液中的8-OH-dG的尿酸水平在2.7-13 ng / mg肌酸之間，而據(jù)報道，通過LC-MS測定，血漿中游離的8-OH-dG的血漿水平在4-21 pg / ml之間。

儲存和穩(wěn)定性
如果在包裝盒外部指示的有效日期之前按指示存放和使用組件，則該套件將按照特定的方式運行。除標準溶液外，所有試劑均在4°C下穩(wěn)定，標準溶液應在-20°C下保存。為了獲得存儲效果，應將8-OHdG標準品等分成小份，然后適當存儲。避免重復冷凍/解凍循環(huán)（10 µL標準品可以繪制三份標準曲線。

測定步驟

1. 在樣品和標準稀釋劑中制備標準品和樣品。
2. 將50 µL準備好的標準液和樣品一式三份加到適當?shù)目字小?/font>
3. 將50 µL稀釋的抗體制劑添加到適當?shù)目字小?/font>
4. 用板蓋蓋好板，然后在室溫（20-25°C）下孵育1小時。
5. 用1X洗滌緩沖液洗滌板4次。
6. 向每個孔中添加100 µL TMB底物。
7. 蓋好板并在室溫下于黑暗中顯影該板30分鐘。
8. 向每個孔中添加100 µL終止溶液。
9. 在酶標儀上于450 nm處測量吸光度。
10. 繪制標準曲線并計算樣品濃度。