中文名:抗纖溶酶
英文名:α2-Antiplasmin
英文簡稱:α2-AP
產(chǎn)生器官:肝臟
簡介:α2-抗纖溶酶(α2-Antiplasmin, α2-AP)是由肝臟合成分泌的,含有452個氨基酸的單鏈糖蛋白,分子量為70 000,屬于絲氨酸酶抑制物家族成員之一,在人血漿中α2-AP是主要的纖溶酶抑制物,在控制纖溶中起關(guān)鍵作用。
實驗:
為此制備α2-AP單克隆抗體,建立ELISA方法用于纖溶系統(tǒng)的監(jiān)測,為進一步提高抗原的免疫原性,減少抗原用量,延長抗原釋放時間,用大分子惰性物質(zhì)如硝酸纖維素膜(NC膜)作為抗原載體進行脾內(nèi)包埋免疫。我們將抗原吸附于NC膜上,沿小鼠左肩正中線下胸背部縱形切口1 cm長,逐層入腹,輕輕牽出脾臟,以刀尖沿脾縱軸輕劃一小口,置入1個三角形載有α2-AP抗原的NC膜,使之*包埋于脾臟內(nèi),觀察無出血后回納脾臟,依次縫合傷口。
間隔3 w后,用同樣方法再進行1次,于加強免疫后第3天取小鼠脾細胞與骨髓瘤細胞(5∶1),用PEG-4000常規(guī)方法進行融合[2,3],HAT培養(yǎng)基選擇培養(yǎng),當(dāng)克隆長至1/10孔大小時,采用間接ELISA法篩選分泌抗體陽性雜交瘤細胞株,并采用有限稀釋法對陽性雜交瘤細胞進行亞克隆,建立了2株穩(wěn)定分泌抗-α2-AP單克隆抗體的雜交瘤細胞株,分別命名為3H4和2E3,并用α2-AP采用常規(guī)方法免疫家兔,制備抗-α2-AP多克隆抗體血清。
對其中的1株3H4進行研究,其雜交瘤染色體眾數(shù)為96.37±1.90,分泌的抗體為IgG1亞類,kappa型。ELISA檢測腹水效價1∶106,采用飽和硫酸銨鹽析法從腹水純化McAb 3H4,SDS-PAGE檢測有較高純度。3H4抗體對α2-AP標(biāo)準(zhǔn)品為陽性反應(yīng),而對ATIII及纖維蛋白原均為陰性,說明對其無交叉反應(yīng)。此雜交瘤細胞株3 d傳1代,體外傳代培養(yǎng)6個月以上,ELISA檢測抗體滴度無明顯降低。采用ELISA法檢測正常人血漿α2-AP含量,以純化的McAb 3H4包板,兔抗α2-AP為多抗,辣根過氧化物酶標(biāo)記的羊抗兔IgG作為三抗,以ABTS為底物,ELISA法檢測了30名正常人枸緣酸鈉抗凝血漿(1∶9)α2-AP含量,其結(jié)果為(98±1.99) mg/L。
選購指南:
蛋白購買:
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 價格 | 品牌 |
HA2AP-0230 | Human alpha-2 Antiplasmin | 1x100 µg | 2432.85588 | Haematologic Technologies |
HA2AP-0230 | Human alpha-2 Antiplasmin | 5x100 µg | 10983.2814 | Haematologic Technologies |
HA2AP-0230 | Human alpha-2 Antiplasmin | 5x1 mg | 96133.2372 | Haematologic Technologies |
HA2AP-0230 | Human alpha-2 Antiplasmin | 10x1 mg | 189668.2788 | Haematologic Technologies |
HA2AP-0230 | Human alpha-2 Antiplasmin | 50x1 mg | 853861.554 | Haematologic Technologies |
HA2AP-0230 | Human alpha-2 Antiplasmin | 100x1 mg | 1665207.18 | Haematologic Technologies |
HA2AP-0230 | Human alpha-2 Antiplasmin | 500x1 mg | 7499337.3 | Haematologic Technologies |
a2AP | a2-Antiplasmin | 0.1 mg | 2635 | Enzyme Research2016 |
a2AP | a2-Antiplasmin | >5 x 0.1 mg | 2600 | Enzyme Research2016 |
抗體購買:
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 價格 | 品牌 |
SA2AP-IG | Sheep anti human a2-Antiplasmin purified IgG | 10 mg | 2822 | affinitybiologicals |
GA2AP-IG | Goat anti human a2-Antiplasmin purified IgG | 5 mg | 2635 | affinitybiologicals |
GA2AP-HRP | Goat anti human a2-Antiplasmin peroxidase conjugated IgG | 0.2 mg | 4029 | affinitybiologicals |
GA2AP-AP | Goat anti human a2-Antiplasmin affinity purified IgG | 0.5 mg | 5066 | affinitybiologicals |
SA2AP-IG | Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)sheep, purified IgG, | 10 mg | 2822 | Enzyme Research2016 |
GA2AP-IG | Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)goat, purified IgG, | 5 mg | 2635 | Enzyme Research2016 |
GA2AP-HRP | Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)goat, perox-conj. IgG, | 0.2 mg | 4029 | Enzyme Research2016 |
GA2AP-AP | Anti-human a2Antiplasmin (a2AP)goat, affinity purified IgG, | 0.5 mg | 5066 | Enzyme Research2016 |
13081-05021 | Alpha-2 Antiplasmin, anti-human | 150 ug | 2800 | AssayPro |
13081-05011 | Alpha-2 Antiplasmin, anti-human | 150 ug | 2320 | AssayPro |
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